淋巴細胞分離液實驗
淋巴細胞分離液（200ml）詳細介紹
淋巴細胞分離液是帶有熒光的無菌水溶液。主要成分是fico11400于泛影酸葡萄甲胺，適用于從血液中分離所需細胞。在醫(yī)療和醫(yī)學(xué)生物學(xué)中廣泛應(yīng)用。本淋巴細胞分離液為無菌包裝。未啟封前置于10℃以下易出現(xiàn)白色結(jié)晶。影響分離效果。啟封后短置4℃保存。分離過程應(yīng)在18~25度環(huán)境下進行。本品無細菌，無支原體，無病毒，低熱源。無菌條件下分離的細胞可用于細胞培養(yǎng)。密度為1.077±0.0001g/ml，適用于從血液及組織均漿中分離所需細胞。
使用方法：取新鮮抗凝血1ml，與全血及組織均漿稀釋液以1:1混勻后。小心加于2ml的細胞分離液的液面上面。以1500~2000轉(zhuǎn)/分離心（半徑15cm水平轉(zhuǎn)子）15分鐘。此時離心管中由上至下分為四層。第一層是血漿層，第二層是環(huán)裝乳白色淋巴細胞，第三層是透明分離液層。第四層是細胞層。收集第二層細胞放入含細胞洗滌液4~5毫升的試管中。充分混勻后，以1500~2000轉(zhuǎn)/分離心。10~30分鐘，沉淀經(jīng)反復(fù)洗兩次即可得到所需細胞。本淋巴細胞分離液是無菌即用型。在低粘度時高密度。好的分離溶液的密度參照具體產(chǎn)品的標(biāo)簽。
注意事項：
1、啟封后應(yīng)置于4℃的保存條件下避免微生物污染。
2、細胞分離液從冰箱中取出后不能立即使用，需待溶液溫度升至室溫搖勻后使用。
3、整個分離過程中，溫度應(yīng)控制在18~28℃且在無菌環(huán)境下避免微生物污染，否則會影響分離質(zhì)量。
特別注意：精欣華實驗室的細胞分離液是敏光型的。這種細胞在運輸貯藏過程中要注意避光保溫，由于各種品牌離心設(shè)備性能不同。國內(nèi)南北地區(qū)的環(huán)境和溫度差不同，可能影響分離效果。用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)速，離心時間，摸索好的分離條件。
淋巴細胞分離液說明書
淋巴細胞分離液是一種旨在通過葡萄糖和液影酸鈉混合液達到特定的比重。然后通過離心分層獲得純化的單核細胞淋巴細胞。
（產(chǎn)品內(nèi)容）淋巴細胞分離液200ml/瓶。
產(chǎn)品說明書一份。
（產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)）低粘度高密度無菌。（即用型）
熱源檢測結(jié)果 <0.5EU/ml
（操作步驟）操作開始前。室溫預(yù)熱淋巴細胞分離液，然后進行下列操作。
（注：本方法適用于外周血，臍血，同樣適用于骨髓，以及組織勻漿液中分離去除紅細胞）
1，準(zhǔn)備無菌的錐形里管
2，加入淋巴細胞分離液3ml
3，用hank's液或PBS緩沖液1:1比例（如果全血樣本粘稠，可適當(dāng)增大比例）稀釋抗凝過的全血樣品。
4，小心沿著管壁，接近分離液層面。非常緩慢的加入新鮮的稀釋過的，全血樣本在淋巴細胞分離液上面
（注意，切記不要攪渾淋巴細胞分離）
5，小心放進離心機離心30分鐘，速度為400g
6，小心取出離管，切記不要震動。
7，可見上層為淡紅色透明血漿，其次為薄薄的至密白色環(huán)，白色環(huán)為單核細胞淋巴細胞。
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