淋巴細(xì)胞分離液實(shí)驗(yàn)
淋巴細(xì)胞分離液（200ml）詳細(xì)介紹
淋巴細(xì)胞分離液是帶有熒光的無(wú)菌水溶液。主要成分是fico11400于泛影酸葡萄甲胺，適用于從血液中分離所需細(xì)胞。在醫(yī)療和醫(yī)學(xué)生物學(xué)中廣泛應(yīng)用。本淋巴細(xì)胞分離液為無(wú)菌包裝。未啟封前置于10℃以下易出現(xiàn)白色結(jié)晶。影響分離效果。啟封后短置4℃保存。分離過(guò)程應(yīng)在18~25度環(huán)境下進(jìn)行。本品無(wú)細(xì)菌，無(wú)支原體，無(wú)病毒，低熱源。無(wú)菌條件下分離的細(xì)胞可用于細(xì)胞培養(yǎng)。密度為1.077±0.0001g/ml，適用于從血液及組織均漿中分離所需細(xì)胞。
使用方法：取新鮮抗凝血1ml，與全血及組織均漿稀釋液以1:1混勻后。小心加于2ml的細(xì)胞分離液的液面上面。以1500~2000轉(zhuǎn)/分離心（半徑15cm水平轉(zhuǎn)子）15分鐘。此時(shí)離心管中由上至下分為四層。第一層是血漿層，第二層是環(huán)裝乳白色淋巴細(xì)胞，第三層是透明分離液層。第四層是細(xì)胞層。收集第二層細(xì)胞放入含細(xì)胞洗滌液4~5毫升的試管中。充分混勻后，以1500~2000轉(zhuǎn)/分離心。10~30分鐘，沉淀經(jīng)反復(fù)洗兩次即可得到所需細(xì)胞。本淋巴細(xì)胞分離液是無(wú)菌即用型。在低粘度時(shí)高密度。好的分離溶液的密度參照具體產(chǎn)品的標(biāo)簽。
注意事項(xiàng)：
1、啟封后應(yīng)置于4℃的保存條件下避免微生物污染。
2、細(xì)胞分離液從冰箱中取出后不能立即使用，需待溶液溫度升至室溫?fù)u勻后使用。
3、整個(gè)分離過(guò)程中，溫度應(yīng)控制在18~28℃且在無(wú)菌環(huán)境下避免微生物污染，否則會(huì)影響分離質(zhì)量。
特別注意：精欣華實(shí)驗(yàn)室的細(xì)胞分離液是敏光型的。這種細(xì)胞在運(yùn)輸貯藏過(guò)程中要注意避光保溫，由于各種品牌離心設(shè)備性能不同。國(guó)內(nèi)南北地區(qū)的環(huán)境和溫度差不同，可能影響分離效果。用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)速，離心時(shí)間，摸索好的分離條件。
淋巴細(xì)胞分離液說(shuō)明書
淋巴細(xì)胞分離液是一種旨在通過(guò)葡萄糖和液影酸鈉混合液達(dá)到特定的比重。然后通過(guò)離心分層獲得純化的單核細(xì)胞淋巴細(xì)胞。
（產(chǎn)品內(nèi)容）淋巴細(xì)胞分離液200ml/瓶。
產(chǎn)品說(shuō)明書一份。
（產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)）低粘度高密度無(wú)菌。（即用型）
熱源檢測(cè)結(jié)果 <0.5EU/ml
（操作步驟）操作開(kāi)始前。室溫預(yù)熱淋巴細(xì)胞分離液，然后進(jìn)行下列操作。
（注：本方法適用于外周血，臍血，同樣適用于骨髓，以及組織勻漿液中分離去除紅細(xì)胞）
1，準(zhǔn)備無(wú)菌的錐形里管
2，加入淋巴細(xì)胞分離液3ml
3，用hank's液或PBS緩沖液1:1比例（如果全血樣本粘稠，可適當(dāng)增大比例）稀釋抗凝過(guò)的全血樣品。
4，小心沿著管壁，接近分離液層面。非常緩慢的加入新鮮的稀釋過(guò)的，全血樣本在淋巴細(xì)胞分離液上面
（注意，切記不要攪渾淋巴細(xì)胞分離）
5，小心放進(jìn)離心機(jī)離心30分鐘，速度為400g
6，小心取出離管，切記不要震動(dòng)。
7，可見(jiàn)上層為淡紅色透明血漿，其次為薄薄的至密白色環(huán)，白色環(huán)為單核細(xì)胞淋巴細(xì)胞。
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